黃曲霉毒素B1是自然界中*強(qiáng)的致癌物之一。它普遍存在于玉米、花生、巴西堅(jiān)果和棉籽中。由于霉菌毒素的毒性，歐洲對(duì)黃曲霉毒素B1的限量為2ppb，對(duì)總黃曲霉毒素的限量為4ppb。

該酶標(biāo)儀可快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)谷物、飼料等食品中的黃曲霉毒素B1，下面小編就如何使用酶標(biāo)儀檢測(cè)黃曲霉毒素的正確方法做如下講解。

一、檢測(cè)原理

黃曲霉毒素B1檢測(cè)試劑盒是基于直接競爭酶聯(lián)免疫吸附法的原理。

(1)樣品提取物或黃曲霉B1標(biāo)準(zhǔn)品100ul，酶聯(lián)共軛物200ul，混合后取100ul。

(2)加入抗體包覆的微孔中，等待15分鐘。

(3)洗板去除不參與抗原抗體反應(yīng)的黃曲霉毒素B1，

(4)將酶底物100ul加入微孔中，等待5分鐘，顏色變藍(lán)，顏色與黃曲霉毒素B1含量成反比，

(5)加入100ul的終端液，顏色變黃。

二、測(cè)試步驟

1. 取5ml固體或液體樣品，加入70%甲醇25ml，混合3分鐘，休息10分鐘，過濾，收集濾液，吸濾液100ul，加入分析緩沖液100ul，混合。

2. 取出涂有抗體的綠色稀釋孔和無色稀釋孔，分別放在平板架上。

3.將酶偶聯(lián)物200ul加入綠色稀釋孔中，然后分別從標(biāo)準(zhǔn)樣(0,2,5,20,50ppb)和步驟1待測(cè)混合樣品中分別吸收100ul，混勻3次。

4. 將100ul的混合液加入無色抗體包被稀釋孔中靜置15分鐘。

5. 將液體倒入小孔中，用蒸餾水沖洗每個(gè)小孔。將微孔倒掛在紙巾上，瀝干水分。

6. 加入100ul基材靜置5分鐘，直至顏色變藍(lán)。

7. 加入100ul的終端液，顏色會(huì)變黃。

8. 機(jī)器測(cè)試(酶標(biāo)濾鏡450nm，微分濾鏡630nm)

9. 稀釋因子f

10. 定量限:原料奶0.002ug/kg，

11. 牛奶或花生醬≤20ug/kg，合格，

12. 計(jì)算公式:X= c*f

注意:

1. Assay Buffer Assay Buffer Assay Buffer Assay Buffer Assay溶液

2. 使用前應(yīng)將套件還原至室溫(18~30度)。使用后應(yīng)置于2~8度冰箱內(nèi)保存

3.標(biāo)準(zhǔn)樣品含有毒素和致癌性。使用時(shí)應(yīng)戴橡膠手套、安全眼鏡、工作服等防護(hù)裝備

4. 在讀數(shù)前，微孔中不能有氣泡，否則會(huì)影響分析結(jié)果

5. 標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)r≥0.9850

6. 請(qǐng)嚴(yán)格遵守指定的操作時(shí)間，否則數(shù)據(jù)將無法讀取